Rhan 4. Effeithiau meysydd electromagnetig amledd isel iawn ar ataliad celloedd y tiwmor a'r mecanwaith posibl

info-1437-249

trypsin (roedd yr amser treulio gorau posibl yn amrywio o gell i gell: 293 t, 1 mun; hepg2, 1 mun; a549, 2 mun) . y treuliad

ei derfynu yn y cyfrwng, ac ychwanegwyd yr holl gelloedd at y tiwb centrifuge . Yna, glanhawyd y twll

halwyn arferol lawer gwaith a'i ychwanegu at y tiwb centrifuge . ar yr adeg hon, roedd y tiwb centrifuge yn cynnwys pob cell .

A adawyd celloedd yn y twll o dan y microsgop .

Celloedd Ataliedig: Gosodwyd pob ataliad celloedd mewn tiwb centrifuge . golchwyd y tyllau ag arferol

halwynog sawl gwaith a'i osod yn y tiwb centrifuge . ar yr adeg hon, roedd y tiwb centrifuge yn cynnwys pob cell . y

Gwelwyd pores ar gyfer gweddillion celloedd o dan y microsgop .

Cyfrif: Cafodd y celloedd eu canoli, eu hail -wario mewn cyfrwng priodol, wedi'i wanhau'n rhannol, a'u staenio

gyda trypan glas . Yna, chwistrellwyd 10 µl ohono trwy'r gwydr gorchudd .

Fformiwla gyfrifo: Nifer y gelloedd/4 × cyfaint × cymhareb gwanhau × 104 .

Cafodd y celloedd ym mhob grŵp eu cyfrif dair gwaith am gyfanswm o dri grŵp .

canfod gwerth pH .Y fflwroleuedd athraidd pilen BCECF AC a fflwrfeydd pH-sensitif

Cent Probe 2 ', 7'-bis-(2- carboxyethyl) -5- Defnyddiwyd carboxyfluorescein (biotechnoleg beyotime, llestri) i asesu

Y gwerth pH mewngellol . diwylliwyd y celloedd mewn platiau da 96- ac roeddent yn agored i faes magnetig 5- mt, 20- Hz Hz

Am 2 h ar y 2 ddiwrnod cyntaf . ar ddiwrnod 3, ail -wariwyd y celloedd mewn 100 µl o 25 µm bcecf am mewn 0.04% pluronic

F -127 Datrysiad gweithio a'i ddeor mewn deorydd CO2 yn 37 ± 0 . 18 gradd am 1 h. Disodlwyd yr uwchnatur

gyda byffer HHBS (AAT BioQuest, UDA), ac roedd y celloedd yn destun amlygiad maes magnetig am 2 h . y

Yna disodlwyd uwchnatur â PBS, a phennwyd y gwerthoedd pH gan ddefnyddio cytometreg llif FITC (FACS

Calibur, bd) .

Profion crynodiad calsiwm mewngellol .Y calbryt llifyn fflwroleuedd athraidd pilen

Defnyddiwyd 520 am (aat bioquest) i asesu'r crynodiad calsiwm mewngellol . diwylliwyd y celloedd yn

96- platiau ffynnon ac yn agored i faes magnetig 5- mt, 20- Hz am 2 h ar y 2 ddiwrnod cyntaf . ar ddiwrnod 3, roedd y celloedd yn

ail -wario mewn 100 µl o 5 µm calbryte 520 am mewn 0.04% pluronic f -127 datrysiad gweithio a'i ddeor mewn a

Deorydd CO2 yn 37 ± 0 . 18 gradd am 1 h. Disodlwyd yr uwchnatur â byffer HHBS (AAT BioQuest), a'r

Roedd celloedd yn agored i'r maes magnetig am 2 h . yna disodlwyd yr uwchnatur â PBS, a'r mewngell

Penderfynwyd ar werthoedd crynodiad calsiwm lular gan ddefnyddio cytometreg llif FITC (FACS calibur) .

Penderfynu ar botensial pilen celloedd .Penderfynwyd ar botensial y bilen gan ddefnyddio'r

Lliw fflwroleuedd potensial-sensitif bis- (1, 3- asid dibutylbarbitwrig) trimethine oxonol (dibac4) (3) (aat bio

Quest) . Mae'r llif fflwroleuol dibac4 (3) wedi'i dreiddio i'r celloedd wedi'u dadbolareiddio â photensial pilen uchel,

gan arwain at gynnydd yn y dwyster fflwroleuedd mewngellol . rhyddhawyd dibac4 (3) o'r hyperpo

celloedd larized, a gostyngodd y dwyster fflwroleuedd mewngellol . diwylliwyd y celloedd mewn platiau 96- yn dda a

Yn agored i faes magnetig 5- mt, 20- Hz am 2 h ar y 2 ddiwrnod cyntaf . diwylliwyd y celloedd mewn 100 µl o HHBs .

Ar ddiwrnod 3, ail -wariwyd y celloedd mewn 100 µl o 10 µm dibac4 (3) am mewn 0.04% pluronig f -127 gweithio solu

tion a'i ddeor mewn deorydd CO2 ar 37 ± 0 . 18 gradd am 1 h. Disodlwyd yr uwchnatur â byffer HHBS

(Aat bioquest), ac roedd y celloedd yn agored i'r maes magnetig am 2 h . yna disodlwyd yr uwchnatur

Penderfynwyd ar PBS, a photensial pilen y gell gan ddefnyddio cytometreg llif FITC (FACS calibur) .

Canfod ïon sodiwm .Diwylliwyd y celloedd mewn platiau 96- da ac roeddent yn agored i 5- mt, 20- Hz magnetig

maes am 2 h ar y 2 ddiwrnod cyntaf . ar ddiwrnod 3, disodlwyd y cyfrwng â 100 µl o HHBs a 100 µl o 10 µm

Sbfi am (Cayman Chemical) mewn datrysiad gweithio 0 . 04% pluronig f -127. Disodlwyd yr uwchnatur gyda

Byffer hhbs (aat bioquest) ar ôl 4- h deori mewn deorydd CO2 ar 37 ± 0.18 gradd, ac roedd y celloedd yn agored

I'r maes magnetig am 2 h . penderfynwyd ar yr ïon sodiwm ar 330/80 cyffro ac allyriadau 528/20 gan ddefnyddio a

Profwr Microplate .

Canfod ïon potasiwm .Diwylliwyd y celloedd mewn platiau 96- da ac yn agored i 5- mt, 20- hz mag mag

maes netig am 2 h ar y 2 ddiwrnod cyntaf . ar ddiwrnod 3, disodlwyd y cyfrwng â 100 µl o HHBs a 100 µl o

10 µm pbfi AM (Cayman Chemical) mewn datrysiad gweithio 0 . 04% pluronig f -127. Ar ôl 4- h deori mewn CO2

Deorydd ar 37 ± 0.18 gradd, disodlwyd yr uwchnatur â byffer HHBS (AAT bioQuest), ac roedd y celloedd yn

Yn agored i'r maes magnetig am 2 h . cynhaliwyd y penderfyniad ïon potasiwm ar gyffro 330/80 a

Allyriadau 528/20 gan ddefnyddio profwr microplate .

Lliwio glas trypan .Roedd 293 T, HepG2, ac A549 celloedd yn y cyfnod twf logarithmig yn cael eu treulio trypsin

a'u cynaeafu . Casglwyd celloedd raji yn uniongyrchol . yn dilyn centrifugation, cafodd y celloedd eu staenio â'r hanfodol

Lliw trypan glas . Cafodd y celloedd byw eu cyfrif o dan ficrosgop golau gwrthdro (Carl Zeiss, yr Almaen) . y gell

Penderfynwyd ar gyfraddau atal twf, a chafodd cromliniau cynrychioliadol eu plotio . cyfradd atal (%)=(num

ber celloedd yn y grŵp rheoli - rhif celloedd yn y grŵp maes magnetig) / nifer y celloedd yn y rheolaeth

Grŵp × 100%.

Dadansoddiad Ystadegol .Mynegwyd yr holl ddata fel gwall cymedrol ± safonol y cymedr, a dadansoddiad unffordd o

Defnyddiwyd amrywiant i'w gymharu rhwng grwpiau lluosog . Defnyddiwyd y prawf t myfyriwr i gymharu'r rhai a gafodd ei drin

yn erbyn grwpiau heb eu trin . gwerth ap<0.05 indicated a statistically significant difference. The confirmatory results

yn P.<0.05 were obtained from repeating studies at least two times. Each set of experiments had three parallel

Samplau ac ailadroddwyd pob arbrawf dair gwaith .

Argaeledd data

Cyflwynir yr holl ddata yn yr erthygl gyhoeddedig hon a ffeil atodol .

Cyfeiriadau

1. zhang, x . et al . Gall meysydd magnetig ar amledd isel iawn (50 Hz, 0.8 mt) gymell y defnydd o lefelau calsiwm mewngellol mewngellol

Yn osteoblastau . Biochem . Biophys . res . cyfathreb . 396 (3), 662–666 (2010) .

{2. li, j {. et al . apoptosis a ysgogwyd gan faes magnetig statig naturiol mewn cell canser yr afu . electromagn biol {{}} med {{. 33} (1), 4) 4) 47-

3. koh, e {. k . et al . a 60- Mae maes magnetig sinusoidal Hz yn cymell apoptosis celloedd canser y prostad trwy rywogaethau ocsigen adweithiol .}}}}}}}}

J . radiat . biol . 84 (11), 945–955 (2008) .

4. Cameron, I {. l . et al . maes electromagnetig therapiwtig (TEMF) ac arbelydru gama ar dyfiant xenograft canser y fron dynol,

angiogenesis a metastasis . cell canser int . 5, 23 (2005) .

5. de seze, r . et al . effeithiau amser 100 mt yn amrywio meysydd magnetig ar dwf tiwmorau mewn llygod . bioelectromagnetics 21 (2), 107–111

(2000).

6. novikov, v {. v ., novikov, g {. v . & fesenko, e {. e {. Effaith Wells Effaith}

Meysydd ar dwf tiwmor mewn llygod wedi'u brechu â charcinoma ascites Ehrlich . bioelectromagnetics 30 (5), 343–351 (2009) .

7. TATAROV, I {. et al . Effaith meysydd magnetig ar dwf tiwmor a hyfywedd . comp . med {{}} {}} (4), 339–345 (2011)}}

8. tofani, s {. et al . cynyddu goroesiad llygoden, ataliad twf tiwmor a lleihau p53 imiwno -weithredol ar ôl dod i gysylltiad â magnetig i magnetig

meysydd . bioelectromagnetics 23 (3), 230–238 (2002) .

9. tofani, s {. et al . mae meysydd magnetig statig ac elf

10 . 1002/bem .69 (2001).

10. Williams, c {. d . et al . Effeithiau maes electromagnetig therapiwtig ar angiogenesis a thwf tiwmor . gwrthganser res . 21, 3}

3891 (2001).

11. yamaguchi, S {. et al . Effeithiau ysgogiad magnetig pylsog ar ddatblygiad tiwmor a swyddogaethau imiwnedd mewn llygod . bioelectromag

Netics 27 (1), 64–72 (2006) .

{12. berg, h {. et al . Effeithiau maes bioelectromagnetig ar gelloedd canser a thiwmorau llygod {. electromagn biol . med {. 29} (4) (4021 (40}, 1321 (

13. liang, y {. et al . nerth gwell Daunorubicin yn erbyn is-linell gwrthsefyll aml -rug KB-CHR -8-5-11 gan faes magnetig pylsog {.

Anticacer res . 17 (3c), 2083–2088 (1997) .

14. Omote, y . et al . Triniaeth tiwmorau arbrofol gyda chyfuniad o faes magnetig pylsio a chyffur antitumor . jpn {. J.

Canser res . 81 (9), 956–961 (1990) .

15. xu, l . et al . effaith ataliol synergaidd maes magnetig statig a chyffuriau antitumor ar hepa 1-6 celloedd . sheng wu gong gong xue xue

Bao 31 (9), 1363–1374 (2015) .

16. Gellrich, D ., Becker, s . & strieth, s . Mae meysydd magnetig statig

Mewn cyfuniad â paclitaxel . canser lett . 343, 107–114 (2014) .

{17. el-bialy, n {. s . & rageh, m . m {. mae maes magnetig amledd isel iawn yn gwella effeithiolrwydd therapiwtig cisplatin dos isel mewn dos isel mewn

Triniaeth carcinoma Ehrlich . biomed . res . int . 2013, 189352 (2013) .

18. Gellrich, D . et al . Mae modiwleiddio amlygiad i faes magnetig statig yn effeithio ar therapi wedi'i dargedu o diwmorau solet yn vivo {. gwrthganser res {{{4}

38, 4549–4555 (2018).

19. crocetti, s . et al . Mae meysydd electromagnetig pwls dwyster isel ac amledd yn amharu'n ddetholus ar hyfywedd celloedd canser y fron . plos

Un 8 (9), e72944 (2013) .

20. raylman, r {. r ., clavo, a . c . & wahl, r {.} l . y twf i amlygiad cryf}} Magnetig Magnetig}

Bioelectromagnetics 17 (5), 358–363 (1996) .

21. Wang, t . et al . cyfranogiad mynegiant midkine yn effeithiau ataliol meysydd magnetig amledd isel ar gelloedd canser . bio

Electromagnetics 32 (6), 443–452 (2011) .

22. Buckner, c . a . et al . Mae atal twf celloedd canser trwy ddod i gysylltiad â maes electromagnetig sy'n amrywio amser penodol yn cynnwys math T

sianeli calsiwm . PLoS One 10 (4), E0124136 (2015) .

23. Wang, m . h . et al . Effaith paramedrau maes electromagnetig amledd isel iawn ar amlhau canser y fron dynol .

Electromagn . biol . med . 40 (3), 384–392 (2021) .

24. kim, s {. h . et al . gwenwyndra Bioassay mewn llygod mawr Sprague -Dawley sy'n agored i faes magnetig trionglog 20 kHz am 90 diwrnod {{6} biolect

Netics 27 (2), 105–111 (2006) .

25. Ashdown, C {. p . et al . Mae caeau magnetig amledd isel pylsiedig yn cymell aflonyddwch pilen tiwmor a hyfywedd celloedd wedi'u newid . biophys {6}

J. 118, 1552–1563 (2020).

26. watson, j {. m ., parrish, e . a . & rinehart, c {. a {{6} twf detholus o Gynecent Detholiadol Gyneg

meysydd . gynecol . oncol . 71 (1), 64–71 (1998) .

27. zhou, y . et al . Trosglwyddo signal . Mae potensial pilen yn modiwleiddio dynameg ffosffolipid pilen plasma a signalau K-Ras {{{5}

Gwyddoniaeth 349, 873–876 (2015) .

28. Berzingi, s {., Newman, m . & yu, h {. g . gan newid bioelectricity ar ataliad celloedd canser y fron dynol {}}}}}}}

(2016).

29. leslie, t {. k . et al . sodiwm homeostasis yn y micro -amgylchedd tiwmor . biochim {{}}, bio -}. 188304

(2019).

30. Wang, x {. x . et al . Mae dadansoddiad mynegiant methylation DNA ar raddfa fawr ar draws 12 canser solet yn datgelu hypermethylation yn y

Llwybr signalau calsiwm . oncotarget 8 (7), 11868–11876 (2017) .

Cydnabyddiaethau

Diolchwn i'r Athro Peter K . Cyfraith o'r Sefydliad Therapi Cell, Wuhan, China, am gymorth technegol .

Cyfraniadau Awdur

Dyluniodd J . s . yr astudiaeth, perfformio'r rhan fwyaf o'r arbrofion, dadansoddi data ac ysgrifennu'r llawysgrif . h . w .

cynghorwyd ar ddylunio arbrawf ac wedi helpu gydag arbrofion . y {. j ., x . j ., y . c ac y . y}}}}}}}}

a pherfformio arbrofion . w {. y . j . a nodwyd ar y llawysgrif . z z .} m, K .} C, x} C, x} C. Z . l . c a j . m . w Paruti

pated wrth gynhyrchu a mesur offerynnau maes magnetig . g . h . y . wedi'i ddylunio a goruchwylio'r

astudio, dehongli data ac ysgrifennu'r llawysgrif .

Cyllid

Y Gronfa Arbennig ar gyfer Atal a Thrin Canser a Datblygu Gwyddoniaeth a Thechnoleg Shanghai Foun

Dation (rhif grant CT20200517A) .

Diddordebau cystadleuol

Nid yw'r awduron yn datgan unrhyw fuddiannau cystadleuol .

Gwybodaeth ychwanegol

Gwybodaeth AtodolMae'r fersiwn ar -lein yn cynnwys deunydd atodol sydd ar gael yn https: // doi . org/

10.1038/s41598-023-34144-5.

Ohebiaetha dylid cyfeirio ceisiadau am ddeunyddiau at G . y .

Ailargraffiadau a Gwybodaeth Caniatadauar gael yn www . natur . com/ailargraffiadau .

Nodyn y CyhoeddwrMae Natur Springer yn parhau i fod yn niwtral o ran honiadau awdurdodaethol mewn mapiau cyhoeddedig a

Cysylltiadau Sefydliadol .

Mynediad AgoredMae'r erthygl hon wedi'i thrwyddedu o dan Greative Commons Attribution 4.0 International

Trwydded, sy'n caniatáu defnyddio, rhannu, addasu, dosbarthu ac atgynhyrchu mewn unrhyw gyfrwng neu

Mae fformat, cyhyd â'ch bod yn rhoi clod priodol i'r awdur (au) gwreiddiol a'r ffynhonnell, yn darparu dolen i'r

Trwydded Creative Commons, a nodi a wnaed newidiadau . y delweddau neu ddeunydd trydydd parti arall yn hyn

Mae erthygl wedi'u cynnwys yn Nhrwydded Creative Commons yr erthygl, oni nodir fel arall mewn llinell gredyd i'r

Deunydd . Os na chynhwysir deunydd yn nhrwydded Creative Commons yr erthygl ac nid yw'r defnydd a fwriadwyd

Wedi'i ganiatáu trwy reoleiddio statudol neu'n fwy na'r defnydd a ganiateir, bydd angen i chi gael caniatâd yn uniongyrchol o

Deiliad yr Hawlfraint . I weld copi o'r drwydded hon, ewch i http: // CreativeCommons . org/trwyddedau/gan/4 . 0/.